30多年前,当人们在对噬菌体的宿主特异性的限制‐修饰现象进行研究时,首次发现了限制性内切酶。细菌可以抵御新病毒的入侵,而这种“限制”病毒生存的办法则可归功于细胞内部可摧毁外源DNA的限制性内切酶。首批被发现的限制性内切酶包括来源于大肠杆菌的EcoR Ⅰ和EcoR Ⅱ,以及来源于Heamophilus influenzae的Hind Ⅱ和Hind Ⅲ。这些酶可在特定位点切开DNA,产生可体外连接的基因片段。研究者很快发现内切酶是研究基因组成、功能及表达非常有用的工具。1 ﹒ Ⅰ型限制性内切酶是一类兼有限制性内切酶和修饰酶活性的多个亚基的蛋白复合体。因长时间消化,限制酶溶液中可能存在的杂酶会影响试验结果。
……