这一技术利用凝胶过滤把高分子量DNA与小分子分开,最常用于将掺入的标记d NTP与通过切口平移或补平3 ′凹端而得到标记的DNA分开。操作方法有两种:一是常规的柱层析法,适应于需要收集含有大小不同各种成分的分子洗脱组分的情况。另一种方法是把凝胶基质填装于一次性注射器内,通过离心进行层析。﹒用灭菌玻璃棉封堵一次性的5ml玻璃吸管或巴斯德吸管,即可简单的制作成层析柱,层析柱中装填Sephadex G‐50凝胶,用数倍柱床体积的1 × TEN缓冲液洗柱。﹒将注射器放入一支10~15ml塑料离心管中,在台式离心机上于室温用吊桶式转头以1600g离心4分钟。0)代替TCA/焦磷酸钠溶液洗涤DE81滤膜外,其他操作与TCA沉淀法基本相同。
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