Northern印迹杂交是在Southern印迹杂交的基础之上发展而来的一种技术。其基本原理是:将RNA样品通过琼脂糖凝胶进行分离,再转移到固相支持载体上,用核素或生物素标记的探针对固定于膜上的mRNA进行杂交,将具有阳性信号的位置与标准分子量分子进行比较,可知此mRNA的分子量大小。根据杂交信号的强弱进行比较,可知基因表达的丰度,因此这一技术广泛应用于基因的表达调控、结构和功能研究。Northern印迹基本原理与Southern印迹类似,但RNA变性方法与DNA不同,不能用碱变性,否则会引起RNA的水解。本实验以毛细管虹吸印迹法为例介绍RNA的转移过程,此方法稍加修改后也可用于Southern印迹。RNA膜转移完成后,杂交方法和一般核酸分子杂交类似。
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