蛋白质工程技术原理及应用实例表参见表16‐2。根据上述抗原表位预测结果,研究人员用insight软件,模拟Ala浏览技术和序列删除技术,替换优势抗原表位的某些氨基酸残基或直接删除抗原优势表位,但不涉及参与催化的亲核基因,Thr12、Try25、Ser58、Thr89起催化活性的残基在突变中不发生改变。对上述突变体均进行表达纯化,比较各种突变体的抗原性与酶活性,结果表明酶活性有了改善(比活达到了400I U/mg)而抗原性大大下降,除m L‐ASP Ⅲ外,其余突变体的抗原性都比WL‐ASP大大降低,尤其m L‐ASP Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ抗原性降低最为明显。
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