依赖IL‐3生长的细胞系在有IL‐3存在时增殖呈剂量依赖关系,在没有IL‐3存在时于24~36小时内停止生长并死亡。因此,根据细胞的增殖情况来反映IL‐3的活性。这些细胞包括肥大细胞系和髓样细胞系,MC‐9是依赖IL‐3生长的肥大细胞系,在含IL‐3的完全培养基中长期生存和增殖。1)收集对数生长期MC‐9细胞,用完全培养液洗2~3次,除去存留的IL‐3,调整细胞浓度为5 × 105/ml。3)取50 μ l细胞悬液加入培养板中(终浓度为104个/孔),置37℃、5%CO2培养箱培养24小时。2)人IL‐3检测的方法是利用人慢性髓系白血病CML患者的白血病瘤细胞,初代培养后用于实验。6)OPD有毒,操作时应注意防护。
……