[文献资料]七、［35S］‐TBPS与大鼠皮层匀浆及切片结合实验

通过测量对［ 35S ］‐TBPS结合于大鼠皮层细胞膜的抑制作用，来筛选作用于benzodiazepine／GA‐BA／chloride离子通道复合物惊厥结合位点的抗惊厥药。雄性Wistar大鼠，冰上分离大脑皮层，加20倍体积冰冷的0.32mol／L蔗糖溶液匀浆（Tissumizer 40档20s）。次日，将组织匀浆放入盛有温水的烧杯内解冻，约15min，然后40000g离心30min。25μl组织标本按1∶30匀浆。用存在与不存在10mmol／L印防己毒素时结合之差来确定特异性结合，典型者为总结合的85%～90%，药物每个浓度抑制百分率皆为三个相同管测定的平均值，用log‐pro‐bit作图法计算竞争性药物的IC50值。向管中加入250μl组织匀浆,振荡，25℃预孵育30min。