此为传统的测定氨基酸的方法。自70年代应用柠檬酸锂缓冲液系统后,各个氨基酸都能得到完全分离。由于各种氨基酸离子对离子交换树脂上的离子亲和力强弱不同,亲和力弱的氨基酸不易保留在柱子上最先洗脱下来,相反,亲和力强的氨基酸则后洗脱,据此将各种氨基酸分离开。新鲜的脑组织洗净血液,擦干,称重后倒入离心管中(插在冰里),加入4ml冰冷的4%磺基水杨酸,用Polytron(5档,10s)匀浆,20000 × g冷冻离心(10min)沉淀变性蛋白,上层透亮液即含有游离氨基酸,取30 μ l进样测定,样品保存于- 20℃中,备用48h。上机测定的样品瓶清洗前需用低浓度的NaOH浸泡数分钟。
……