[文献资料]一、靶蛋白的放射性标记

用于标记蛋白质的放射性同位素通常是35S，其半衰期为87.1d，蛋白质是以35S‐标记蛋氨酸或35S‐蛋氨酸和半胱氨酸，这些氨基酸是哺乳动物细胞的必需氨基酸，必须由培养基中提供。因此，放射性标记就可以通过将细胞培养在含35S‐蛋氨酸或同时含35S‐蛋氨酸和35S‐半胱氨酸的培养基中来进行。为了增加同位素标记氨基酸的掺入率，可选择不含蛋氨酸或蛋氨酸和半胱氨酸的细胞培养基。1 ﹒吸去培养基，用不含蛋氨酸和血清的培养基（Med‐AA）洗2次。4 ﹒吸去含有同位素的培养基，如果只检测细胞内的抗原，则弃去含同位素的培养基。5 ﹒用预冷的PBS洗2次细胞，尽量吸去残留的PBS，然后即可进行细胞裂解。