1 ﹒成年大鼠深麻醉后,暴露心脏及主动脉,从左心室心尖部向主动脉方向插入灌注套管,并于右心房减一小口。先用预冷的50~100ml PBS灌流以去除心脏内的血液。再以约250ml含2%多聚甲醛和0.2%多聚苯甲醌混合固定液灌注。灌流速度约为25ml/min。2 ﹒待灌流结束后,取出脑组织,浸入50ml上述混合固定液中2h。有的组织不可能进行组织灌流,如人的组织,胚胎组织及细胞培养等,此时则可采用浸润方法固定。2 ﹒如为贴壁培养的细胞,在固定1~2h后,以PBS洗2~3遍,再加入叠氮钠磷酸缓冲液,4℃下保存。9 ﹒置切片于预先以明胶溶液处理的载玻片上,经数小时或过夜干燥后,再以一系列浓度梯度乙醇脱水。
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