[文献资料]六、吗啡受体

10%蔗糖溶液。Wistar大鼠（200～300g）断头取脑（去除小脑以及桥脑以下部分），加9倍体积（W／V）冷的10%蔗糖溶液制成匀浆。P2膜制剂150 μ l（含蛋白2mg）与50 μ l ［ 3H ］ DHM（终浓度1nmol／L）及50 μ l吗啡10 － 4mol／L，非特异结合管）或药物溶液（竞争结合管）或Tris‐HCl缓冲液（总结合管），终体积0.5ml。在30℃保温15min，加冷Tris‐HCl缓冲液1.5ml，1000 × g离心10min（4℃），用Tris缓冲液再洗涤一次，加0.5ml SDS溶液使沉淀溶解，移置于液闪瓶中，加10ml闪烁液，用液闪仪计数。以其机率值与药物浓度对数作图求得IC50。