[解剖学&组织学]（一）端粒限制性片段（TRF）分析

端粒限制性片段（TRF）分析法，又称DNA印迹法（southernblot，SB）是第1种测定端粒长度的方法，现已广泛应用于分析DNA和端粒结构。利用限制性核酸内切酶Hin FI或Rsa Ⅰ消化DNA，然后用琼脂糖电泳分离大小不同的片段，再将片段转移至硝酸纤维素膜或尼龙膜上。用32P同位素或生物素、碱性磷酸脂酶标记的端粒特异探针（CCCATT）n与其杂交。TRF分析的结果不仅表示所有染色体端粒的长度，还表示部分亚端粒区长度。平衡液:1.5mol/LNa Cl,用0.5mol／LTris‐HCl缓冲液（p H7 ﹒。图27‐1B显示的是端粒酶缺失（Terc －／－）小鼠和端粒酶杂合子（Terc ＋／－）小鼠以及它们后代的骨髓细胞的TRF分析。