由于巯基具有很强的亲核性,巯基基团一般是酶分子中最容易反应的侧链基团,因此人们最先研究它的特异性修饰试剂并研究了巯基在酶催化过程中的重要作用以及在一些酶分子中对维持亚基间相互作用所做的贡献。TNBS与赖氨酸残基反应,在420nm和367nm能够产生特定的光吸收,Xia等人用TNBS标记了GSH转移酶的1个反应活性很高的赖氨酸残基,证实了在酶的活性部位GSH结合区域存在一个赖氨酸残基,即Lys‐44。丙酮酸激酶是众多酶中精氨酸残基修饰研究的一例,伴随精氨酸残基的修饰,酶分子可逆地失活,底物保护作用说明酶分子在底物磷酸烯醇式丙酮酸的磷酸结合位点具有1个必需的精氨酸残基。
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