虽然体外拉米夫定对HIV‐1和HIV‐2复制的抑制作用没有齐多夫定和扎西他宾强,但拉米夫定对细胞的毒性小。拉米夫定磷酸化后产生有活性的5 ′‐三磷酸代谢物,该代谢物在细胞内的半衰期长。拉米夫定三磷酸代谢产物亦有抗病毒活性,其主要作用方式是使病毒DNA链合成终止而抑制HIV的逆转录,也可抑制RNA和DNA依赖的DNA逆转录的多聚酶活性。抑制乙型肝炎病毒拉米夫定体外在HBV‐DNA感染的人肝癌细胞内能抑制HBV‐DNA复制,在HBV感染的黑猩猩体内有抑制病毒抗原的作用。在Ⅲ期临床试验中,拉米夫定治疗52周,治疗组中52%的患者肝脏组织学改变有改善,而安慰剂组只有约1/4的患者有改善。
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