以酶为作用靶的高通量检测方法,绝大多数是直接检测酶活性。具体方法根据酶的不同而不同,主要有基于放射性的方法和基于比色、荧光的方法两大类。检测第二信使或下游机制如磷酸化,传统方法也比较麻烦,不适于高通量检测,但将这些机制与报告基因相偶联则能克服。传统基于过滤的方法繁琐、通量低,而一些多通道自动化细胞采集和闪烁计数设备的引入,使之成为有效的高通量检测技术。构建了Cre重组酶与糖皮质激素受体结合区域的融合基因,与lox P/虫荧光素酶报告基因一起转染于哺乳动物细胞中。在96孔板上,将芘碳酰巴龙霉素(PCP),RNA结构配成溶液后加入有受试化合物的板孔中,用荧光读板器考察荧光恢复的程度。
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