二、热刺激法

系利用一定强度的温热刺激动物躯体某一部位以产生痛反应。根据电生理研究结果，热刺激强度应使皮温升高至45～55℃之间，低于此范围不会产生明显痛反应，高于55℃则有可能灼伤动物。对于强效药物，刺激强度宜大（55℃），弱效药物则强度宜低一些，以刺激开始至出现反应的潜伏期为测痛指标评价药效。将体重20g左右雌性小鼠放在预热至50～55℃金属板上，恒温（变化在±0.5℃内），以小鼠舔后足反应或跳跃反应的潜伏期为痛阈指标，实验时两者选其一。欲求药物镇痛效应的ED50和ED95，均可按某一动物用药后痛阈值大于阴性对照组相应时间点痛阈均数加上3个标准差，进行数据转换后判定是否有效，再用几率单位法等方法计算。