答:病毒的分离培养方法主要包括:① 动物接种;② 鸡胚接种;③ 细胞培养。细胞培养(cell culture)是从生物体内取出组织或细胞,在体外(in vitro)模拟体内生理环境,在无菌、适当温度和一定营养条件下,对这些组织或细胞进行孵育培养,使之保持一定的结构和功能,细胞培养也称为组织培养(tissue culture),两者可作为同义语使用。细胞培养又包括传统细胞培养、离心增强快速细胞培养和遗传改造细胞培养等。传统细胞培养是病毒分离培养中最常用的方法,病毒在合适细胞系与适宜生长条件下能够在细胞中复制增殖。

根据细胞来源、染色体特性及传代次数等细胞可分为:① 原代细胞(primary cell);② 二倍体细胞系(diploid cellline);③ 连续细胞系(continuous cell line)。由于连续细胞系对病毒敏感性稳定,易于获取和保存,广泛用于病毒分离,如Hela细胞和Hep-2细胞等。根据培养细胞的生长方式,又可将细胞培养分为单层细胞培养(monolayer cell culture)和悬浮细胞培养(suspended cell culture)。传统细胞培养具有结果可靠、敏感性高等优点,特别适用于新病毒或变异株的检测,也是抗病毒药物体外敏感性试验的基础;但传统细胞培养法对技术要求较高、检测周期相对较长,且多种病毒缺乏敏感细胞株或敏感细胞株不易获取,因此限制了其向临床实验室的推广。

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