为什么PCR-序列特异引物检测HLA分型适用于中低通量实验室？

答：PCR-序列特异引物（polymerase chain reaction sequence specific primer，PCR-SSP）的原理是根据HLA等位基因各型别核苷酸碱基序列的差异性，设计出一系列特异性引物。因Taq DNA聚合酶没有3′→5′核酸内切酶活性，引物3′端最后一个碱基是否与模板配对起关键作用，决定着能否扩增出产物。该方法结果的判读只需要借助常规的琼脂糖凝胶电泳，根据是否出现特异性的阳性条带及有无扩增产物来判断基因的多态性。因此试验流程较短，方法简单、快速，可以迅速获得分型结果，适合小批量标本，从基因组DNA模板的提取到获得检测结果一般需要几个小时。但是由于该方法工作量大，一般需要好几十孔PCR反应才能指定一个标本中低分辨率的分型结果，是通量最小的分型方法，所以目前仅中低通量的实验室用该方法检测。