为什么ELISA测定中常使用辣根过氧化物酶作为酶标记物？

答：辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）来源于植物辣根中，分子质量为40ku，是由无色酶蛋白（主酶）和亚铁血红素（辅基）组成的一种复合物。辅基是酶的活性基团，为深棕色的含铁卟啉环，最大吸收峰在波长403nm处；而主酶与酶活性无关，最大吸收峰在275nm。HRP的纯度用RZ（纯度数）表示，它是以HRP分别在403nm和275nm处的吸光度比值来表示。RZ值与酶活性无关，后者以单位（U）表示：即1分钟将1μmol底物转化为产物所需的酶量。酶变性后，RZ值不变活性降低，因此，使用酶制剂时，酶活性单位比RZ值更重要。HRP易获得高纯制品，稳定性及酶标记物的收率较高，且价格较低，故易应用普及。HRP对热和有机溶剂比较稳定，氰化物或硫化物在10^-6 ～10^-5 mol/L时能可逆性抑制HRP作用，氟化物、叠氮化合物在高于10^-3 mol/L浓度时可以抑制HRP作用，强酸也可有效抑制HRP。因此，酶免疫测定时可用叠氮钠及硫酸等终止其酶促反应。