二、ES和EG细胞培养和建系的基本技术

不论ES细胞或EG细胞，原代或初期培养阶段一般都须依赖于能分泌它们在体外存活增殖所必需生长因子的饲养层细胞。不同类型的饲养层细胞分泌的生长因子略有所不同，但都要求培养过程中的饲养层细胞不分裂增殖而仍然保持代谢活性。常用的饲养层细胞有下列两种：1 .用作ES细胞或EG细胞培养的饲养层MEF或STO细胞均须用10mg/L丝裂霉素C（mitomycin C）在37℃下处理4小时，以终止其细胞分裂，用前经PBS彻底洗涤。一旦建系成功后，则一般可撤除饲养层细胞，常规培养液中只需添加适量LIF细胞因子或含有LIF的B ......