原位PCR技术可应用于细胞悬液、细胞涂片、冰冻切片以及石蜡切片。相比较而言,以悬浮的完整细胞做原位PCR效果最好,石蜡切片效果最差。石蜡切片效果不好的原因有玻片上做PCR,热传导较差,热对流不均匀,TaqDNA酶被玻璃片吸附等。因此,石蜡切片原位PCR的标本制备时应注意以下几点:1 .组织细胞的固定。常用的蛋白酶有蛋白酶K、胰蛋白酶或胃蛋白酶。蛋白酶消化处理组织细胞可提高通透性,有利于后续进行的各反应成分进入细胞内或核内,但同时也增加了扩增产物弥散的机会,有可能出现假阳性或假阴性的结果。 ......