应用孕酮标准品与核素标记孕酮对抗体竞争结合的情况来制作标准曲线。在动物上使用被试药物后应用上述原理,在不加标准品的情况下测定血浆孕酮,以确定是否具有孕酮样作用。其他试剂见第一节睾酮放射免疫测定法。1)取血浆:孕鼠为0.05ml,未孕鼠为0.1ml,雄鼠0.2ml。2)将上述血浆放入具塞试管中,用双蒸水补足到0.5ml,加0.1mol/L NaOH0.2ml,再加重蒸二氯甲烷(CH2Cl2)5ml,加盖振摇5min。3)吸去血浆层,用双蒸水洗涤2次,每次1ml,然后1500r/min,离心3min。以结合率对标准品剂量作标准曲线。被检品经测定后在标准曲线上找到相应的剂量,按第一节血浆睾酮放射免疫测定法进行计算。
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