血红素氧合酶(HO)的测定技术可分为两种类型。一种是测定HO的功能,另一种是HO的组织或细胞定位。可以省去固定CO的环节并可快速测定组织提取物或细胞中的CO活性。上悬液留做测定HO活性用,蛋白质含量用Lowry法测定(牛血清白蛋白为标准对照)。然后按上面气相色谱仪定量法介绍的方法测定。在定位HO‐2时,将步骤7中的第一抗体换为特异性的兔抗鼠HO‐2抗体即可。由于HO和NO的合酶在组成成分、诱导调节和功能上有许多相似之处,在用Western blot定位HO时最好同时用特异性的抗NO合酶抗体作为另一种对照(如小鼠的单克隆抗体),这样可以保证结果的特异性。8 ﹒如欲观察HO的三维分布和细胞内亚分布,可选用confocal激光扫描显微镜观察。
……