[文献资料]五、脑缺血体外模型

原代培养的神经元培养10～14天，根据实验要求的培养皿数量，配制足够培养基，用5%CO2和95%N2混合气饱和10min（注意无菌操作，可在管的头端加一个0.22 μ m的微孔过滤器），将培养基预温至37℃。取出培养皿，用预温后的PBS洗两次，加入脱氧培养基并将其置于无氧室中（室内温度保持37℃和一定湿度）。通过无氧手套先将培养皿置于真空室中，关闭真空室，启动自动抽滤按钮。我们分别将培养的海马神经元和脑微血管内皮细胞置于无氧室中培养4和12h，然后置于CO2培养箱中培养24h，细胞死亡率可达30%～40%。用一吸管小心将海马脑片转移至离心管中，30min后再转移至正常人工脑脊液中，37℃孵育5h，可对损伤程度进行评价。