[概述]2﹒解决活化诱饵问题——“交换的”双杂交和基于RNA聚合酶Ⅲ（RNA polⅢ）的双杂交系统

双杂交系统的主要限制之一是诱饵蛋白（传统上与DBD融合）不应自活化转录。在最初的工作中，大量提取的克隆是自活化的DBD融合物，这一问题的解决是通过预筛选来完成的。相互作用一旦发生，138恢复了TFⅢC因子的余下成分,使聚合物Ⅲ能够转录酵母必需基因SNR6。聚合酶Ⅲ尚无已知的转录活化因子，并且聚合酶Ⅱ反式活化子不能调节酵母中聚合酶Ⅲ介导的转录。事实上，正如指出的那样，强的转录活化子如GAL4或与GAL4 DBD融合的VP16不能活化UAS（G）‐SNR6基因的转录。