三、HERG钾离子通道细胞模型的建立

A：采用KCl电极充灌液（KCl140mM，EGTA10mM，Hepes10mM）记录到的sEPSC，神经元膜钳制电位为－ 80mV。用胶原酶消化分离细胞的前后,均要用无钙的ND96冲洗细胞3～4次，停止酶促反应，含钙溶液存在时胶原酶对卵母细胞特别有害，主要是由于蛋白酶的激活会破坏细胞膜和通道。在进行微注射时,应使用颈部较为细长，开口内径约为5～10 μ m的微管，穿刺细胞不宜过深，以针尖刚刚穿过细胞膜为宜，尽量减少对卵母细胞的损伤，拔针时动作要轻微缓慢，避免胞内物质溢出。