亲和吸附的强弱除与亲和吸附剂及配体的性质密切相关外,还与缓冲液的种类、离子强度、p H、温度和层析流速有关。为了获得理想的层析分离和较集中的洗脱样品,层析柱用前必须充分平衡,流速尽可能慢。例如利用N6‐(6‐氨基己烷)‐AMP‐sepharose吸附乳酸脱氢酶,洗脱时所需Na OH的量随温度上升而相应减少(图11‐。特殊洗脱:当一些蛋白质的吸附十分紧密,不能用非专一性吸附方法洗脱时,可用特殊的化学方法裂解配基与载体的连接键,获得的配基‐蛋白质络合物,再用透析或凝胶过滤除去配基,一些特殊键的断裂方法有:硫酯键用p H11.5(或1mol/L)羟胺处理30min。
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