反相层析(reversed phase chromatography)和疏水作用层析(hydrophobic inter action chromatography)都是基于物质分子的疏水基团与层析介质上的疏水基团相互作用在非极性的固定相和极性的流动相之间不断分配而得以分离的技术。疏水性强的称为反相层析,而较弱的则称为疏水作用层析。反相层析和疏水作用层析的介质都含有疏水基团,但反相层析介质的疏水基团密集程度比疏水作用层析介质要高的多,并且常使用长脂肪链如十八碳烷烃作为功能基,疏水性也很强。疏水作用层析的洗脱方式与反相层析一样,分为梯度洗脱和阶梯洗脱两种。目的组分全部洗脱后,可将盐浓度降至零以最高效率洗下剩余的杂质。
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