[生理学]（二）放射配体受体结合分析法

放射配体受体结合法（radio‐ligand‐receptor binding assay，RBA）与经典的酶‐底物相互作用的原理相似，这种方法是基于配体与受体分子之间的结合反应。对于可逆的结合反应，可用下式表示： ［RL］ 为复合物的浓度，［L］ 为游离配体浓度，［R］ 为未结合的受体浓度，在反应达到平衡时，K d＝ K－1／K 1，这里的平衡解离常数K d代表了配体与受体分子之间的亲和力，K－1是解离速率常数，K 1是结合速率常数。为了减少配体和受体的非特异性结合，可选用高比度的标记物。目前RBA 法已经广泛用于研究药物和各种受体的相互作用，不仅可以测定配体与受体结合的K d值，还可测定结合部位的总浓度（B max）。另外，根据非标记物与标记物对受体蛋白竞争性结合的原理，可用来比较各种非标记物取代剂对受体亲和力的大小，用于筛选药物。还可以作为一种微量测定方法，测定待测样品中非标记物的浓度。在取代实验中，常常用I C 50或K i值表示配体与受体亲和力的大小，I C 50是药物抑制50%标记配体特异性结合所需求的浓度，而K i值代表非标记配体的结合亲和常数，［L］ 是标记配体的浓度，K d值是标记配体的解离常数。实验数据可进行各种处理，如Lineweaver‐Burk 双倒数作图法、Scatchard 作图法和Hill 作图法等。