第四节 体外培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧／再给氧损伤实验法

利用体外培养的大鼠乳鼠心肌细胞，通过暂时停止供应心肌细胞生存必需的糖和氧，并缺糖缺氧一定的时间后恢复供糖供氧，可分别造成模拟心肌缺血与缺血后再灌注模型，能在较长时间内观察药物对细胞生理功能、生化和形态学的影响。心肌细胞缺氧／再给氧损伤按上述方法造成心肌细胞缺氧，缺氧3h后换用正常含糖的Eagle培养基或Hank液（5%空气＋ 5%CO2）培养1h，造成再给氧损伤。检测心肌细胞缺氧／再给氧损伤时的自由基作用及药理的影响，可用电子自旋共振测定心肌细胞的自由基量，或通过水杨酸捕获羟自由基（HO ·）生成加合物二羟苯甲酸，用高效液相色谱‐电化学法间接测定培养基中的HO ·含量。