灭活污染DNA的首选方法是紫外光照射,除靶DNA和Taq多聚酶外,所有的试剂和物品短暂地经波长为254~300nm的紫外光照射30分钟就可灭活。其基本原理是紫外光能引起胸苷二聚体的形成和其他共价修饰的污染DNA,而被翻译的DNA不能扩增。扩增产物或靶序列小于300bp时,紫外光照射常形成不完全灭活,甚至大分子DNA(500bp或> 500bp)经紫外光照射也形成不完全灭活,推测系大分子DNA存在独特的序列所致。UV照射可能对耐热DNA多聚酶和寡核苷酸引物有毒性作用,由此而降低了扩增的效率。另外,扩增混合物 ......