[辅助检查]（八）长片段PCR（long distance PCR）

采用PCR扩增超过5kb长片段时，扩增效率显著下降（即长片段产量明显减少）。这些减少的长扩增片段只是被部分地合成，大小不一，从而在电泳中呈抹片形式。现认为耐热DNA聚合酶是影响长PCR是否顺利扩增的一个关键因素。随后，人们利用两种耐热DNA聚合酶的混合体进行长片段PCR扩增，第一种耐热DNA聚合酶缺乏3 ′ → 5 ′外切酶活性。这样，在长PCR扩增过程中，当第一种酶（如Taq DNA聚合酶）错误地掺入一个dNTP时，随后的DNA新链合成延伸过程将变慢甚至中止。将Mg2 ＋浓度减少10%～40%也能提高长 ......