第二节 目的基因核酸序列的测定方法

基因序列测定方法包括手工测序和自动测序，由于手工测序操作复杂，测序长度一般也不够长，结果分析麻烦，且需要使用同位素进行标记，故目前常用DNA序列自动测序。所选用的6%聚丙烯酰胺胶可读出距离引物5 ′端25～400碱基（bp）之间，如果要读出距引物5 ′端更远的序列，可选用4%～5%的聚丙烯酰胺来测定，反之，要选择高浓度的聚丙烯酰胺凝胶。注意：自动测序仪为高压电泳，电压范围在0～5000V，一般设定在1500V左右，所以在电泳时，切勿打开电泳箱，如有情况需要停机时，要按暂停键，待高压指示灯熄灭后，方可打开。 ......