[概述]第九节 目的基因在哺乳动物培养

将外源基因导入哺乳动物细胞主要通过两类方法：一是感染性病毒颗粒感染宿主细胞，二是通过脂质体法、显微注射法、磷酸钙共沉淀法及DE AE‐葡聚糖法等非病毒载体的方式将基因导入到细胞中。利用哺乳动物细胞表达外源基因时，大多数情况下不需要诱导，但当表达产物对细胞有毒性时应采取诱导，这样可避免表达产物产生早期就对细胞产生影响。随后，通过对tTA的氨基酸序列进行改造，构建了受四环素正调节的Tet‐on基因表达系统，该系统在没有四环素的情况下启动子不被激活，而在加入四环素或强力毒素后目的基因高效表达。 ......