[辅助检查]第三节 真核细胞RNA的制备

本方法制备的RNA可直接用于cDNA合成和体外转录，Northern Blot的分析。细胞的处理:含有培养细胞的平皿,在室温下用5ml PBS洗涤细胞2次，按108细胞加3.5ml异硫氰酸胍溶液，铺于细胞表面，用橡皮细胞刮子刮下细胞，混匀黏稠状的细胞裂解液，并将其刮到平皿边缘。细胞处理:①单层培养细胞:取含有细胞的平皿,用预冷的1ml PBS洗涤细胞3次，用少量PBS小心冲刮下细胞，移入至预冷的离心管内，于4℃以2000g离心5min，弃上清，含沉淀的离心管置于冰浴。弃去酒精，晾干沉淀，重溶于150 μ ......