PCR可以有效扩增两末端之间DNA序列。一般的PCR体系对5kb以下的基因序列的扩增比较有效,优化条件后最多能扩增10kb左右的序列,对更大片段的DNA则无法有效扩增。PCR产物长度受到限制的主要原因有以下几个:1 .聚合酶有一定的错配率.延伸温度及时间:因为比普通PCR扩增的片段长度长(甚至长得多),因此延伸时间往往也比较长。即在94~95℃变性后,以65℃左右的温度复性并且延伸DNA,而不是将复性和延伸过程分开。除了上面提到的几个比较大的方面外,还有以下两点值得注意:模板DNA完整性:因为模板DNA在 ......