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[辅助检查]第三节 长距离PCR

PCR可以有效扩增两末端之间DNA序列。一般的PCR体系对5kb以下的基因序列的扩增比较有效,优化条件后最多能扩增10kb左右的序列,对更大片段的DNA则无法有效扩增。PCR产物长度受到限制的主要原因有以下几个:1 .聚合酶有一定的错配率.延伸温度及时间:因为比普通PCR扩增的片段长度长(甚至长得多),因此延伸时间往往也比较长。即在94~95℃变性后,以65℃左右的温度复性并且延伸DNA,而不是将复性和延伸过程分开。除了上面提到的几个比较大的方面外,还有以下两点值得注意:模板DNA完整性:因为模板DNA在 ......

——《口腔分子生物学与口腔实验动物模型》
书名:《口腔分子生物学与口腔实验动物模型》
栏目:口腔分子生物学与口腔实验动物模型 > 第一篇 分子生物学方法及在口腔医学中的应用 > 第五章 聚合酶链式反应(PCR)及相关技术
作者:王松灵
参编:边专,王佐林,王松灵,边专,孙宏晨
页码:98-100
版本:1
出版社:人民卫生出版社
出版时间:2011-07-01
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