[辅助检查]（二）定点突变

早期定点突变需要用到单链DNA模板，例如将待突变序列克隆至M13噬菌体（M13 phage），通常一个循环只产生一个位点的突变，既耗时难度又大。近年来由于PCR技术的不断发展，已经可以用PCR方法直接将定点突变引入双链质粒DNA。这里先介绍利用M13噬菌体进行定点突变的方法，再介绍利用PCR进行单一位点以及多个位点定点突变的方法。本方法是在含有目的基因的M13单链噬菌体DNA复制过程中引入突变引物，使得新合成的DNA序列发生定点突变，经克隆测序获得突变体。定点突变引物的设计:按照拟突变的位点设计并合成定点 ......