方案五 全细胞蛋白免疫蛋白质组分析（Immunoproteomic analysis ofBordetella pertussis and identification of new immunoge

菌生长到对数中期,离心收集菌体，悬于预冷的TE缓冲液中，4500g，10min离心，收集菌体，重悬于1ml 0.04mol/L溶菌酶（溶解于TE缓冲液）中，37℃孵育35min。转移完毕后, 10%脱脂牛奶（溶于TBS缓冲液中）37℃，封闭2h，TBS-Tween20漂洗10min后，膜使用一抗即抗血清孵育，血清稀释度：1 ∶ 300 ［一抗溶于含0.05%ween20的TBS（TTBS），包含5%skim milk ］室温，孵育1h。将Western Blotting呈阳性的蛋白质点从染色的胶上切割下来 ......