[辅助检查]（二）差异展示PCR 的改进

最初的差示PCR技术分离差异表达基因，有3个严重问题限制了其充分使用，其中之一是差示出来的条带不能在Northern印迹上完全重现，假阳性率大于70%。把12种3′端锚定引物分成3组,每组4条，3组引物退火温度接近，用不同的引物去重复扩增，只有真正的差异cDNA片段才能被重复扩增出来。用生物素标记的3 ′端锚定引物oligo（dT）MN结合mRNA并起始第一链合成，获得的cDNA仍然结合于磁珠上，以此cDNA作模板，可直接进行差示PCR扩增及差示产物直接测序。此法所需的mRNA量极少，同时还可避免放射性核 ......