[辅助检查]第二节 PCR反应的基本条件及其对PCR的影响

PCR以DNA或RNA为模板进行核酸的体外扩增。RNA的扩增需先反转录成cDNA后才能进行PCR循环。不同来源的核酸标本必须经处理后才能用于PCR的扩增，处理不当或处理过程中DNA的丢失都会导致PCR反应失败。标本采集不当、未能获得所要检测的靶DNA会出现假阴性。但如果待扩增标本中的模板DNA浓度过高将导致扩增失败。引物的量也影响PCR扩增效果，一般每条引物的浓度0.1～1 μ mol或10～100 pmol，以最低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚 ......