第五节 逆转录聚合酶链反应（Reverse Transcription PCR，RT‐PCR）

RT‐PCR检测RNA的灵敏性高，甚至可分析一些极为微量RNA样品。该方法尽管可以初步确定某组织或细胞RNA样品中是否含有某种mRNA，但其结果须通过测序证实。如果用于对某种mRNA进行定量测定，误差较大，应当对结果进行标化。由于cDNA的序列代表了组织细胞中靶mRNA序列，因此RT‐PCR不失为基因表达测定的简便而又有效的方法，特别适用于组织来源困难，组织量少的情况。提取组织或细胞中的总RNA，以其中的mRNA作为模板，采用Oligo（dT）或随机引物，在逆转录酶作用下反转录成cDNA（cDNA第一链的 ......