取培养细胞上清液,浓缩后经12.5%凝胶浓度的不连续SDS-PAGE系统分离, 80mA泳动3 ~ 4小时( 10mm × 10mm胶板) ,当彩色标准蛋白分子量26000与36000蛋白带达到明显的分离效果,且36000分子量带已经超过凝胶板的中央部位时,停止电泳。将电泳凝胶移入方盘内,经电转印液漂洗凝胶,然后移至已铺好滤纸及硝纤膜的湿式电转印夹内,插入电泳槽,置于冰浴内,将电泳槽加满4 ℃预冷的电转印液,反复提插数次,以排除气泡, 350mA起始电流转印,约经1.5小时转印,取下印迹膜,根据印迹膜上R ......