首先准备APC和应答细胞,我们从正常人PBMC开始介绍实验步骤。在6孔板中以每孔20 × 10 6个PBMC细胞在3ml培养基中37℃孵育2个小时,轻轻晃动,然后将上清中不黏附细胞收集冻存,作为后面的应答细胞使用。继续培养一天后,从每孔移去1ml培养基,加入1m l含10ng/m l TNF‐α的新鲜培养基。在最后16小时培养期(过夜)中加入poly I ∶ C(终浓度12.5μ g/ml)。最后,以25Gy照射,用培养基洗两次并以0.3× 10 6/m l重悬。 ......