我用质粒转染细胞,使用的脂质体是Lipofectamine-2000 ,转染步骤按照protocol进行,转染8小时换液,转染36小时后荧光显微镜观察转染效率。但是多次实验得到的转染效率都不高,波动在35%上下,而且死亡细胞也比较多。如果细胞传代次数过多,或者细胞培养过程中曾经发生过细胞过度生长,或者所用试剂或培养条件近期发生改变,都有可能会引起细胞状态不佳,这不仅会造成转染效率低下,而且会降低细胞承受转染的能力,从而升高细胞死亡率。如果种板密度较低,或者因为细胞状态不佳造成转染前细胞数过少,可能会导致转 ......