三、激光扫描共聚焦显微镜应用

用LSCM进行活组织成像比固定的组织成像更为困难，因为标本并不是总能耐受成像所需的苛刻条件。如不能一直保持镜台上的标本存活，感兴趣的区域或结构无法靠近物镜，或标本不适合镜台，会严重影响成像效果。LSCM采集的所有数字图像在分析之前均应先删除未染色时采集的背景荧光，然后在细胞内和细胞外各选择荧光均匀的一个小区，求出其平均荧光强度，删除非特异结合产生的荧光，即可根据Nernst公式算出膜电位值。备负载的细胞必须是活细胞，可以是单个细胞，快速取材的组织块或培养细胞才具备完成负载转换的功能。负载后应在尽可能短时间 ......