基因组步移(genome walking)技术是一种根据已知部分基因组DNA序列,高效获取与已知序列相邻的侧翼序列的技术,是结构基因组研究和功能基因组研究的基础。获取新物种中基因的非保守区域,获得完整的基因序列。以下操作其主要原理是根据已知DNA序列,分别设计3条同向且退火温度较高的特异性引物(SP Primer),与试剂盒中提供的四种经过独特设计的退火温度较低的简并引物,即AP1、AP2、AP3、AP4进行热不对称PCR反应(图3-5-。通常情况下,其中至少有一种简并引物可以与特异性引物之间利用退火温度 ......