[辅助检查]（二）主要步骤

采用质粒、染色体DNA或者PCR产物等双链DNA作为模板进行序列分析时，需经强碱如高浓度NaOH处理，使双链变性解链，形成单链DNA模板。而采用M13噬菌体等单链DNA作为模板进行序列分析时，无需上述变性处理过程。制备好的单链DNA模板与测序引物在适当的反应缓冲体系中混合后，于68℃加热2分钟，然后缓慢冷却至30℃左右，测序引物则会结合到单链模板的相应位置上，完成退火过程。曝光一段时间的X线胶片经显影和定影，即可显示出不同长度单链DNA电泳后的相应显影区带。图4‐5末端终止法测序放射自显影结果。 ......