二、酵母双杂交的主要实验步骤

用于未知蛋白相互作用筛选的酵母双杂交实验步骤较为复杂，其基本步骤可归纳于图12-3。报告基因的检测同自激活检测部分，如果酵母共转化子中的诱饵蛋白与文库蛋白之间存在相互作用，则酵母共转化子可以在营养缺陷的培养基上生长，同时显色筛选克隆呈现蓝色。酵母双杂交方法得到的相互作用是在酵母体内得到的，而且是人为地使两个蛋白表达在一起，而在高等动物体内，两者未必会在细胞内同时同区域表达，所以要用其他方法对筛选的结果进行验证。因此，酵母双杂交系统往往只是一个课题初期采用的方法，但是对于以后的工作会有很重要的多方面的启发和 ......