等位基因特异性PCR技术(PASA)是检测基因点突变的一种PCR技术,该技术关键之处在于引物的设计。该技术的基本原理是其中一条PCR引物3 ′端设置于抗性突变位点处,通常设计两种,一种引物能够与敏感个体的碱基位点配对(S引物),另一种与抗性个体的碱基位点配对(R引物)。由于PASA技术需要针对突变碱基设计特异性引物,因此要求对引起抗性的所有碱基突变非常清楚。但是,PASA检测必须在确定抗性基因的突变位点之后方能实施,否则无法合成含有基因突变位点的PASA引物,另外,PASA技术的PCR反应条件亦难以控制。 ......