[辅助检查]第四节 核酸疫苗的制备

在核酸疫苗成功构建后，在免疫接种前必须获得大量的、高纯度、超螺旋结构的质粒DNA。这就需要通过培养含有表达质粒的工程菌使质粒扩增，利用一系列的纯化方法获得纯度较高的质粒DNA。裂解细菌: 1）SDS碱裂解法：该方法对目前使用的所有大肠杆菌菌株都适用，并可适用于随后的纯化步骤（如聚乙二醇沉淀、CsCl‐EB密度梯度平衡离心、Sepha rose4B层析法等）进行进一步纯化。但由于该方法对仪器的要求较高（需超速离心机）且加入大量致突变剂EB，故现较少使用，对核酸疫苗的纯化而言，更应严禁使用。异丙醇也可使DNA ......