（一）单链测序

Sanger所设计的双脱氧链终止法在初期使用的是单链DNA模板，因此单链模板尤为重要，但在当时却是该法的限制因素。以M13为载体:M13感染细胞后并不使细胞裂解,而是将成熟的病毒颗粒释放到胞外，因而制备模板DNA的方法也比较简单。PCR法:用于测序的单链DNA模板可以通过不对称PCR获得。现今，有许多现成的DNA测序试剂盒，这些试剂盒含有测序所需的大多数成分，如DNA聚合酶、4种dNTP和ddNTP，反应缓冲液以及通用引物等。一般采用放射性核素标记，参照试剂盒所提供的说明进行操作，一般均可获得满意的效果。 ......